p16/Ki-67细胞学双染检测优化宫颈癌筛查，让高级别病变不再“隐形”

       宫颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁女性健康，通过早期筛查可发现宫颈病变，实现早期诊断、早期治疗。传统筛查方法以液基细胞学检查和人乳头瘤病毒（HPV）检查为主，但两种方法都存在不同的局限性。随着医学免疫诊断及免疫治疗的迅猛发展，越来越多的新技术被广泛接受，其中，p16/Ki-67免疫细胞化学检测，简称细胞双染就是其中一种。

       p16INK4a（p16）是一种细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂，已被证实在高危人乳头瘤病毒（HR-HPV）感染中高度表达，被认为是宫颈癌前病变的替代标记物，可作为辅助诊断标志物区分CIN病变，Ki-67是一种核抗原和细胞增值标记物。在正常细胞中，p16和Ki-67的表达是互斥的，因此在同一细胞内同时检测到p16和Ki-67则预示着细胞周期失调和可能发展为癌症的HR-HPV感染。目前国外已进行了大量研究来评估p16/Ki-67双染检测在宫颈癌筛查中检测宫颈癌前病变的临床应用价值。

       美国国家癌症研究所杂志（Journal of the National Cancer Institute，JNCI，影响因子11.577）2013年刊登发表的一项大型前瞻性研究PALMS Study（multicentric Primary ASC-US LSIL Marker Study），便对p16/Ki-67双染检测的临床性能进行了评估。

       背景及目的： 众所周知，巴氏细胞学比人乳头瘤病毒(HPV)检测在高级别宫颈上皮内瘤变(CIN2+)的检测上特异性更高，灵敏度较低。研究评估p16/Ki-67双染细胞学，一种指示转化HPV感染的生物标志物组合，是否能在筛查中提供高灵敏度，同时保持高特异性。并将双染细胞学结果与巴氏细胞学检查和HPV检测进行比较。

       研究方法： 5个欧洲国家共有27349名18岁及以上的女性参加常规宫颈癌筛查。对所有女性进行巴氏细胞学检查、p16/Ki-67双染细胞学和HPV检测。任意一种检测结果为阳性则转诊阴道镜（除30岁以下且只有HPV检测结果呈阳性的女性）。以组织病理学判定结果为CIN2+作为参考标准。

       结果： p16/Ki-67双染细胞学阳性率与巴氏细胞学异常结果的阳性率相当，且低于HPV检测的阳性率，为HPV检测阳性率的50%。在所有年龄段的女性中，双染细胞学比巴氏细胞学更灵敏（86.7% vs 68.5%；P<0.001），且具有同等特异性（95.2% vs 95.4%；P=0.15）。年龄在30岁以下和30岁及以上这两组女性相对表现相似。30岁及以上女性的HPV检测比双染细胞学更灵敏（93.3% vs 84.7%；P=0.03），但特异性较低（93.0%对96.2%；P<0.001）。

       结论：p16/Ki-67双染细胞学对CIN2+的检测具有优于细胞学的灵敏度和不亚于细胞学的特异性。研究表明了双染细胞学作为初筛的潜在作用，特别是用于年轻女性中。

       Background： Pap cytology is known to be more specific but less sensitive than testing for human papillomavirus (HPV) for the detection of high-grade cervical intraepithelial neoplasia (CIN2+). We assessed whether p16/Ki-67 dual-stained cytology, a biomarker combination indicative of transforming HPV infections, can provide high sensitivity for CIN2+ in screening while maintaining high specificity. Results were compared with Pap cytology and HPV testing. Methods: A total of 27 349 women 18 years or older attending routine cervical cancer screening were prospectively enrolled in five European countries. Pap cytology, p16/Ki-67 immunostaining, and HPV testing were performed on all women. Positive test results triggered colposcopy referral, except for women younger than 30 years with only positive HPV test results. Presence of CIN2+ on adjudicated histology was used as the reference standard. Two-sided bias-corrected McNemar P values were determined. Results: The p16/Ki-67 dual-stained cytology positivity rates were comparable with the prevalence of abnormal Pap cytol-ogy results and less than 50% of the positivity rates observed for HPV testing. In women of all ages, dual-stained cytology was more sensitive than Pap cytology (86.7% vs 68.5%; P < .001) for detecting CIN2+, with comparable specificity (95.2% vs 95.4%; P = .15). The relative performance of the tests was similar in both groups of women: younger than age 30 and 30 years or older. HPV testing in women 30 years or older was more sensitive than dual-stained cytology (93.3% vs 84.7%; P = .03) but less specific (93.0% vs 96.2%; P < .001). Conclusions: The p16/Ki-67 dual-stained cytology combines superior sensitivity and noninferior specificity over Pap cytol-ogy for detecting CIN2+. It suggests a potential role of dual-stained cytology in screening, especially in younger women where HPV testing has its limitations.

 表1：巴氏细胞学、p16/Ki-67双染、HPv检测阳性率比较

在进行了所有三项检测的 27248 名女性中，p16/Ki-67 双染细胞学的总体阳性率为5.4％，类似于细胞学≥ASCUS的患病率5.2%，是HPV检测阳性率（10.7%）的一半。

 

表2：巴氏细胞学、p16/Ki-67双染、HPV检测在组织病理学中的诊断价值

       根据数据分析，p16/Ki-67双染具有优于细胞学的灵敏度以及优于HPV检测的特异性，双染阳性高度提示高级别病变，阳性预测值高于细胞学以及HPV检测；双染阴性预测值为90%以上，双染阴性提示高级别病变可能性低。

 

       目前杭州百殷生物科技有限公司自主研发的p16/Ki-67检测试剂盒（免疫细胞化学法），使p16/Ki-67双染有效辅助细胞学检测，识别异常宫颈细胞，优异的阳性预测值能够预测致癌风险。百殷双染匹配杭州海世嘉液基产品，可以实现一次取样同时进行液基细胞学、双染两项检测，从不同角度反映细胞癌前病变，有效提高结果判读一致性。

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依据颜色判读，相对客观，诊断一致性高

 

 

 

 

参考：

陈彩萍，詹雪梅，罗中明，容颖柔(2020): p16/Ki-6双染检测在宫颈上皮内瘤变2级及以上病变中的应用，广东医科大学学报，第38卷第4期, 469-470